应贤平,郁庆明,吴腾捷,李朝选,程鹏飞,宋虹,赵春女,吴文鹃,陈延,郭盛淇,仲伟鉴,肖萍,郑

时间 : 2009-12-03 00:17:10 来源：www.chemyq.com

[摘要]

目的用合成基因表达产物取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）或其他方法重组蛋白抗原，用于ＬＣＭＶ感染的诊断。方法采用Ｐｒｏｓｉｓ软Ｓ件对ＬＣＭＶ核蛋白（Ｎｐ）全长氨基酸序列进行亲疏水性分析，合

前言目的用合成基因表达产物取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）或其他方法重组蛋白抗原，用于ＬＣＭＶ感染的诊断。方法采用Ｐｒｏｓｉｓ软Ｓ件对ＬＣＭＶ核蛋白（Ｎｐ）全长氨基酸序列进行亲疏水性分析，合成ＬＣ－ＭＶｓＲＮＡ第１８１６－２１７８位核苷酸序列编码的Ｎｐ第３８０～５００位氨基酸基因，克隆在Ｈｉｓ－ｔａｇｐＥＴ－２８ａ融合表达，表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化，建立ＥＬＩＳＡ检测试剂。结果表达产物主要以包涵体形式存在，表达量达２０％以上。表达产物经Ｎｉ－ＮＴＡ－Ａｇａｒｏｓｅ纯化后纯度达到９０％以上。经检测９３份人血清。有６份病毒抗体阳性，阳性率为６。５％（６／９３），与全病毒抗原检测结果７。５％（７／９３）相近。结论用合成基因表达产物取代ＬＣＭＶ抗原检测病毒抗体，不仅可以消除病毒传播可能，而且特异性强。为ＬＣＭＶ感染诊断及生物材料质量控制提供有效方法。
ObjectiveToexpressthesyntheticgeneoflymphocyticchoriomeningitisvirus（LCMV）andusetheexpressedproductforthediagnosisofLCMVinfection.MethodsThehydrophilicityandhydro-phobicityofthewholelengthofaminoacidsequenceofnucleoprotein（Np）ofLCMVwereanalyzedbyProsissoftware.Thenthenucleotidesequenceatthesites1816-2178ofLCMVsRNAencodingthe380th-500thami-noacidsofNpwassynthesizedandclonedtoHis-tagpET-28avectorforexpression.Theexpressedproductwaspurif...