淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒核蛋白合成基因的表达及应用应贤平郁庆明等

时间 : 2009-12-02 16:46:43 来源：www.cqvip.com

[摘要]

目的用合成基因表达产物取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）或其他方法重组蛋白抗原，用于LCMV感染的诊断。方法采用Prosis软件对LCMV核蛋白（Np）全长氨基酸序列进行亲疏水性分析，合成ICMV sRNA第1816－2178

摘　　要:目的用合成基因表达产物取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）或其他方法重组蛋白抗原，用于LCMV感染的诊断。方法采用Prosis软件对LCMV核蛋白（Np）全长氨基酸序列进行亲疏水性分析，合成ICMVsRNA第1816－2178位核苷酸序列编码的Np第380－500位氨基酸基因，克隆在His-tagpET-28a融合表达，表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化，建立ELISA检测试剂。结果表达产物主要以包涵体形式存在，表达量达20％以上。表达产物经Ni-NTA-Agarose纯化后纯度达到90％以上。经检测93份人血清，有6份病毒抗体阳性，阳性率为6．5％（6／93），与全病毒抗原检测结果7．5％（7／93）相近。结论用合成基因表达产物取代LCMV抗原检测病毒抗体，不仅可以消除病毒传播可能，而且特异性强。为LCMV感染诊断及生物材料质量控制提供有效方法。