彭萍 翁霞云 谷志远 李琦
【摘 要】 目的 探讨孕中期、孕晚期人乳头状瘤病毒亚临床感染的母婴垂直传播情况及对胎婴儿的影响。方法 采用多聚酶链反应技术对42例孕中期、32例孕晚期妇女的宫颈分泌物、母血、胎盘、羊水、
脐血、新生儿咽部分泌物标本进行HPV-6、11、16、18型DNA检测。结果 孕中期：12例宫颈分泌物HPV阳性（12/42），11例母血HPV阳性（11/42），9例胎盘组织HPV阳性（9/42），22例羊水标本中，仅1例羊水HPV阳性（1/22）；孕晚期：23例宫颈分泌物HPV阳性（23/32），18例母血HPV阳性（18/32），12例胎盘组织HPV阳性（12/32），31例羊水及脐血标本中，4例羊水HPV阳性（4/31），12例脐血HPV阳性（12/31）。17例异常胎婴儿中有3例
胎儿窘迫、1例新生儿高胆红素血症及1例无脑畸形儿的脐血或胎盘组织HPV阳性。结论 孕期HPV感染的母婴传播不但可经产道直接接触传播，还可经血液、羊水及胎盘发生宫内传播，其宫内传播率的高低主要与母血的HPV感染相关。新生儿脐血的HPV感染主要与母血的HPV感染相关，而产时新生儿咽部的HPV感染主要与宫颈分泌物HPV感染相关。妊娠期HPV感染可能与胎儿窘迫、新生儿高胆红素血症、胎儿畸形有关。
【关键词】 人乳头状瘤病毒 感染 妊娠 传播 多聚酶链反应 胎儿 婴儿
VerticalTransmissionandEffectsonFetusandInfantofHumanPapillomavirusAsymptomaticInfectionduringGestationalPeriods
PengPing WengXiayun GuZhiyuan etal
（GeneralHospitalofGuangzhouMilitaryDistrict,Gunagzhou510010）
【Abstract】 Objective ToinvestigatetheverticaltransmissionandtheeffectsonfetusandinfantofHumanPapillomavirus（HPV）asymptomaticinfectionduringthesecondandthirdgestationalperiods.Methods Polymerasechainreaction（PCR）assaywasemployedtodetectHPV-6,11,16,and18DNAin42pregnantwomeninthesecondtrimesterand32inthethird.Samplesfromcervicalvaginalexfoliatedcells,maternalperipheralblood,placenta,amnioticfluid,cordbloodandnasopharyngealsecretionofthenewbornswereexaminedrespectively.Results Inthesecondtrimester,HPV-DNAwasdetectedinthecervicalvaginalexfoliatedcellsof12cases（12/42）,inmaternalperipheralbloodof11cases（11/42）,inplacentaof9cases（9/42）.Onlyoneof22amnioticfluidsampleswasfoundinfected（1/22）.Inthethirdtrimester,HPV-DNAwasdetectedinthecervicalvaginalexfoliatedcellsof23cases（23/32）,inmaternalperipheralbloodof18cases（18/32）,inplacentaof12cases（12/32）,4samplesofamnioticfluidoutofthe31cases（4/31）and12cordbloodsamples（12/31）werefoundinfected.Among17casesofmalformedoratriskfetusesandinfants,HPV-DNAwaspositivein5samplesofneonatalcordbloodorplacenta,including3casesoffetaldistress,1caseofneonatalhyperbilirubinemiaand1caseofanencephalus.Conclusion Duringpregnancy,HPVistransmittedfrommothertofetusnotonlythroughthebirthcanalatbirthbutalsothroughtheblood,amnioticfluidandplacentaduringintrauterinelife,andtheHPVintrauterinetransmissionrateisrelatedmainlytothestateofHPVinfectioninthematernalperipheralblood.HPVinfectionintheneonatalcordbloodiscloselyrelatedtothestatusofHPVinfectioninthematernalperipheralblood,whileHPVpositiveintheneonatalnasopharyngealaspiratesatbirthcorrelatescloselywiththeHPVinfectivestateinthematernalcervicalvaginalcells.ApossiblecorrelationexistsbetweenHPVinfectioninpregnancyandfetaldistress,neonatalhyperbilirubinemiaandfetalmalformation.
【Keywords】 Humanpapillomavirus（HPV） Infection Pregnancy Transmission Polymerasechainreaction（PCR） Fetus Infant
近年女性生殖道人乳头状瘤病毒（humanpapillomavirus,HPV）感染日趋普遍，在我国性传播疾病中仅次于
淋病［1］。我们选取平均年龄相近的孕中、晚期妇女共74例，采用PCR技术，对其宫颈分泌物、母血、胎盘组织、羊水、脐血、新生儿咽部分泌物标本进行最常见的HPV-6、11、16、18型DNA检测，力求对HPV的母婴垂直传播进行直接、全面的观察，并初步探讨孕期HPV感染对胎婴儿的影响。
1 资料与方法
1.1 对象选择 1997年5月～1997年11月期间，按来院就诊日随机选取孕中期42例（孕12+1周～27+6周），年龄20～31岁，平均（25.45±5.22）岁；孕晚期（孕28周～41周），年龄22岁～32岁，平均（27.44±4.62）岁。排除有内科疾病、外阴
瘙痒及
白带常规检查异常者，详细记录孕产妇及娩出儿的一般情况，注意孕中期引产胎儿及孕晚期新生儿有无发育异常。
1.2 临床标本的采集
1.2.1 宫颈冲洗液 抽取5ml生理盐水冲洗宫颈外口（孕晚期者于破膜前），留取冲洗液。
1.2.2 新生儿咽部抽吸物 产时吸取咽部分泌物，于5ml生理盐水中反复涮洗。
1.2.3 羊水 孕中期志愿做利凡诺引产者经腹行羊膜腔穿刺，孕晚期经阴道分娩者于人工破膜前穿刺前羊水囊、剖宫产者于术中，均抽取羊水5～10ml。
以上标本4℃离心（1200r/min,10min）后弃上清，细胞沉淀悬于1mlPBS液中。
1.2.4 胎盘组织 孕中、晚期取胎盘组织1小块（0.5cm×0.5cm），用生理盐水反复漂洗，直至确认无母血污染。
1.2.5 脐血 孕晚期娩出儿，确认无母血污染，抽取1～2ml，肝素抗凝。
1.2.6 母血 抽取孕妇静脉血1～2ml，肝素抗凝。
所有标本均置-20℃保存，备用。
1.3 DNA提取
1.3.1 宫颈冲洗液、新生儿咽部抽吸物及羊水标本 用50～100μl裂解液悬起细胞沉淀，于55℃水浴1h消化裂解细胞，再95℃孵育10min灭活蛋白酶K，4℃离心后，取上清液4μl作为模板于25μlPCR反应体积中。
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