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实验室诊断

时间 : 2016-04-07 11:11:39 来源:求医网

[摘要]

RIA或者ELISA即:放射免疫诊断(RIA)或酶联免疫试验(ELISA)检测血清中抗HCV丙肝病毒模式图1989年,Kuo等建立了抗-C-100放射免疫...

RIA或者ELISA

即:放射免疫诊断(RIA)或酶联免疫试验(ELISA)检测血清中抗HCV

肝病毒模式图1989年,Kuo等建立了抗-C-100放射免疫试验方法(RIA),随后Ortho公司又研制成功酶联免疫试验方法(ELISA)检测抗-C-100。这两种方法均用重组酵母表达的病毒抗原(C-100-3,为NS4编码的蛋白,含363个氨基酸),经纯化后包被微量塑料板孔,然后加被检血清,该病毒抗原即与被检血清中抗-C-100结合,最后加同位素或酶标记的鼠抗人lgG单克隆抗体,加底物显色判断结果。用上述酶联免疫试验法(ELISA)检测抗-C-100有如下缺点:1.抗-C-100出现较晚,约半数输血后丙型肝炎病人于输血后4~6个月抗-C-100首次阳转,因此,不宜作为急性丙型肝炎的常规实验室诊断;2.抗-C-100不是中和抗体,也不是lgM抗体,而是lgG抗体;3.本法不够灵敏,少数丙型肝炎病人检测不到抗-C-100;4.有非特异性,一些自家免疫性慢性肝病患者可出现假阳性,因此,抗HCV阳性需作重组免疫印迹试验(RecombinantImmuneBlotAssay,RIBA,或称WesternBlot)证实。由于HCV核心抗体出现较早,因此,最近美国第二代酶联免疫试验法(ELISA)检测抗HCV。该试剂盒采用HCVC区编码蛋白C-22-3和非结构区NS3编码蛋白C-33-3和C-100-3包被载体。用本法检测抗HCV,其检出率可提高25~30%,且检出抗HDV的时间也可提早16~42天。

HDVcDNA/聚合酶链反应

(HCVcDNA/PolymeraseChainReaction,RTPCR)测定肝和血清中HCVRNA。本法是将HDVRNA逆转录为HCVDNA,选用高度保守的5′非编码区引物扩增放大后作电泳观察结果。本法较灵敏。由于肝和血清中HCVRNA出现较抗-HCV为早,一些HCV感染者抗HCV尚未阳转时,其肝和血清中已可测到HDVRNA。HCVRNA阳性,说明病毒在体内复制;HCVRNA阴转,说明病毒被清除。因此,RT-PCR可作为丙型肝炎的早期诊断和献血员筛查的出现指标,也可作为丙型肝炎预后的一个指标。

(责任编辑:jbwq)

关键词: 实验室 诊断
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