乙肝治疗性疫苗的研究现状

乙型肝炎治疗性疫苗

(一)蛋白疫苗

蛋白疫苗是目前研究最为深入的治疗性疫苗，其主要原理是将乙型肝炎病毒(hbv)衣壳蛋白(如pres1，pres2，s)或核心抗原(hbcag)进行一定的修饰后接种给患者。由于hbv衣壳蛋白和核心抗原均具有较强的抗原性，因此会诱发较强的特异性细胞免疫。目前研究较多的有亚单位疫苗、抗原抗体复合物疫苗和基于表位的疫苗。

pol等采用pres2/s疫苗治疗慢性乙型肝炎，治疗6个月后，疫苗组和对照组血清hbvdna阴转率分别为15%和2.7%。值得注意的是，治疗前血清hbvdna大于200mg/l的患者，疫苗组和对照组血清hbvdna阴转率分别为16.7%和0%。在治疗第6～12个月之间，疫苗组血清hbvdna下降幅度显著大于对照组。但是，在治疗12个月后，疫苗组和对照组血清hbvdna阴转率、hbeag/抗hbe转换率无统计学差异。

hbv核心抗原具有相当强的免疫原性和抗原性。在慢性hbv感染过程中，hbeag是唯一能引发显著免疫反应的抗原，将核心蛋白与pres1的优势表位连接，能获得较为理想的疫苗。chen等运用基因工程技术将pres1抗原蛋白的第3～55位氨基酸连接在截短的hbcag羧基端，制成一种被称为“hbvcs1”的重组抗原，对小鼠进行免疫后测定其抗体滴度，发现小鼠体内产生了强烈的抗-hbc免疫应答和中等程度的抗pres1免疫应答，表明pres1的融合并不影响hbcag的抗原性和免疫性，提示hbvcs1可能有作为乙型肝炎的治疗性疫苗的潜力。

wen等将hbsag和抗-hbs抗体连接起来，组成了抗原-抗体复合物，与单独使用hbsag相比，抗原-抗体复合物显著增加了免疫的效率。其机制可能是由于抗原-抗体复合物中的fc段与抗原提呈细胞膜表面受体结合，加速其对抗原的加工和提呈，同时促进thl型细胞因子ifn-γ的分泌，进而诱发更为强烈的细胞免疫应答。他们用抗原-抗体复合物治疗了l4例慢性乙型肝炎患者，治疗6个月后，血清hbvdna和hbea转阴率分别为64.3%和42.9%。wen等进一步用乙型肝炎表面抗原-抗体免疫复合物(yeast-derivedhepatitisbsurfaceantigen-antibodyimmunogeniccomplex，yic)制成疫苗进行临床试验，第一阶段有22名志愿者分3组分别注射yic30μg、60μg、90μg，第二阶段有9名志愿者分6次注射yic90μg，结果，所有受试者对yic均可耐受，肝功能和肾功能检测均未发现异常，同时产生了最高达1000miu/l的抗-hbs并伴有血清ifn-γ和il-2水平升高，而血清il-4、il-6、il-l0和tnf-α没有显著升高。提示yic不仅有很强诱导产生抗-hbs的能力，而且有很好的安全性。最近的ⅱ期临床试验比较了yic30μg、60μg和铝佐剂，每4周一次，疗程24周治疗慢性乙型肝炎的初步疗效。结果，疗程结束时，yic30μg组、60μg组和铝佐剂组hbeag血清转换率相近，没有统计学差异;但疗程结束后随访24周末，yic60μg组和铝佐剂组hbeag血清转换率分别为21.8%(17/78)和9%(7/78)，95%可信限1.5%～24.1%，有统计学差异。yic30μg组、60μg组和铝佐剂组不良事件的发生率相近，分别为5.1%、3.6%和5.0%。

基于抗原并非直接刺激淋巴细胞，而是经由抗原提呈细胞加工成为抗原表位后呈递给淋巴细胞，进而激活淋巴细胞的原理，heathcote等制成一种脂蛋白疫苗。脂蛋白疫苗的组成包括hbcag的优势ctl表位18～27位氨基酸肽链和能被cd4th细胞识别的破伤风类毒素830～843位氨基酸肽链以及2个棕榈酸分子。动物实验证明，脂蛋白疫苗能有效地诱发特异性抗-hbc细胞毒应答。有19例慢性乙型肝炎患者接受脂蛋白疫苗治疗并未观察到有毒副作用，但其产生的细胞毒反应只有实验动物的1/10，而且对血清hbvdna阴转率、hbeag/抗hbe转换比率没有显著影响。

(二)基因疫苗

研究指出，某些细胞因子如il-2、il-12、ifn-γ能使慢性乙型肝炎患者血清hbvdna水平降低。在dna疫苗中引入细胞因子佐剂，可增强免疫反应并改变t细胞应答的方向，引导其向th1的方向发展。yang等设计了一种包含大部分hbv抗原(hbsag，pres1/s2，hbeag，hbcag)及il-12基因的dna疫苗，与拉米夫定联合治疗了12例慢性乙型肝炎患者，酶联免疫印迹显示，它能诱导机体产生特异性的分泌ifn-γ的t细胞反应，并使50%患者血清hbvdna降低至不可检测水平，而且不伴有血清丙氨酸转移酶的升高。