医学论文,丙型病毒性肝炎发病机制中自身免疫反应的作用

丙型病毒性肝炎发病机制中自身免疫反应的作用

世界华人消化杂志1999年第2期第0卷专家述评

作者：刘文恩　谭德明　范学工　欧阳颗　张　铮

单位：湖南医科大学附属湘雅医院传染科　湖南省长沙市　410008

关键词：肝炎，丙型/病因学；肝炎，丙型/免疫学；自身免疫

　　中国图书资料分类号　R512.6

　　目的　探讨丙型肝炎病毒（HCV）感染的发病机制.

　　方法　应用酶联免疫吸附法、间接免疫荧光法、放射免疫法测定了慢性HCV感染者66例，慢性HBV感染者37例和正常对照39例的血清抗GOR抗体（抗GOR）、抗核抗体（ANA）、抗甲状腺球蛋白抗体及抗甲状腺微粒体抗体（TGA/TMA）.

　　结果　HCV感染者抗GOR，ANA，TGA/TMA的阳性率较正常对照组均明显增高（53.0%vs5.1%,χ2=24.649，P＜0.01；42.4%vs2.6%,χ2=19.490，P＜0.01；13.6%vs0%,χ2=5.820，P＜0.01）；与慢性HBV感染者比较，慢性HCV感染者抗GOR，ANA阳性率显著增高（χ2=20.550，P＜0.01；χ2=4.513，P＜0.05）.慢性HCV感染中，血清谷丙转氨酶（ALT）增高者抗GOR阳性率及ANA阳性率显著高于ALT正常者（65.0%vs34.6%,χ2=6.110；52.5%vs26.9%,χ2=5.910，P＜0.05），HCV-RNA阳性者抗GOR阳性率显著高于阴性者（χ2=4.810，P＜0.05）.

　　结论　上述结果说明HCV感染者存在自身免疫反应，这种自身免疫反应与病毒复制有关，可引起肝功能损害，自身免疫可能是慢性HCV感染的重要发病机制之一.

　　Roleofautoimmunereactionin

　　pathogenesisofchronicHCV

　　infection

　　lIUWen-En,TANDe-Ming,FANXue-Gong,OUYangKeandZHANGZheng

　　departmentofInfectiousDiseases,XiangyaHospital,hunanMedicalUniversity,Changsha410008,HunanProvince,China

　　Subjectheadings　hepatitisC/etiology;hepatitisc/immunology;autoimmunity

　　Abstract

　　aIM　ToexplorethepathogenesisofchronicHCVinfection.

　　mETHODS　Anti-GOR,antinuclearantibodies（ANA）,thyroglobulinantibody（TGA）andthyroidmicrosomeantibody（TMA）weremeasuredbyusingenzyme-linkedimmunosorbentassayandindirectimmunofluorescentassay,radioimmunoassay,respectively.66patientswithchronichCVinfection,37withchronicHBVinfectionand39healthysubjectsascontrolswereobserved.

　　rESULTS　Thepositiveratesofanti-GOR,ANAandTMA/TGAweresignificantlyhigherinHCVinfectedpatientscomparedtothoseinnormalcontrol（53.0%vs5.1%,χ2=24.649，P＜0.01；42.4%vs2.6%,χ2=19.490，P＜0.01;and13.6%vs0%,χ2=5.820，P＜0.01,respectively）.ComparedtoHBVinfectedpatients,anti-GORandANAwerealsosignificantlyincreasedinHCVinfectedpatients（χ2=20.550，P＜0.01andχ2=4.513，P＜0.05）.Thepositiveratesofanti-GORandANAwerehigherinHCVinfectedpatientswithabnormalserumalaninetransaminase（ALT）thaninthosewithnormalALT（65.0%vs34.6%,χ2=6.110，52.5%vs26.9%,χ2=5.910，P＜0.05）.thepositiverateofanti-GORwashigherinpatientswithserumHCV-RNApositivethaninthosepatientswithHCV-RNAnegative（χ2=4.810，P＜0.05）.

　　cONCLUSION　AutoimmunereactionstakepartsinchronicHCVinfection.Theyareprobablyrelatedtovirusreplicationandliverdamage,whichmaybepartlyresponsibleforthepathogenesisofHCVinfection.

　　0　引言

　　丙型肝炎病毒（HCV）感染是输血后肝炎的最主要病因，亦是导致肝硬变和肝癌的重要原因之一.尽管已有若干关于丙型肝炎发病机制的报道，但对于HCV感染所致肝细胞损害的确切机制，仍然了解甚少.近年来，自身免疫在丙型肝炎发病机制中的作用越来越受到了重视.为了进一步探讨自身免疫在丙型肝炎肝细胞损伤中的作用，我们测定了HCV感染者66例血清中的有关自身抗体，报道如下.

　　1　材料和方法

　　1.1　材料　HCV感染者66例，系我科1997-03/1998-03的门诊和住院患者，男42例，女24例，中数年龄48岁；均有输血或血制品史，感染史至少在1a以上.hCV感染的诊断根据血清ALT，血清抗HCV抗体和HCV-RNA的测定.所有病例近3mo内未使用过免疫调节剂；重叠有乙肝病毒（HBV）或庚肝病毒（HGV）感染，及合并有其他严重疾病的患者均从研究对象中去除.健康献血员39例作为正常对照，均已除外HBV和HCV感染.我科同期住院的慢性乙型肝炎患者37例作为对照，其HBV感染的诊断根据血清ALT，血清HBV标志物和HBV-DNA测定，除外了HCV或HGV感染，近3mo内无免疫调节剂使用史.

　　1.2　方法　①自身抗体测定：抗GOR抗体测定采用张艳etal［1］描述的ELISA方法，GOR多肽购自中国科学院上海生物化学研究所，酶标记抗体购自武汉博士德公司；抗核抗体（ANA）测定采用间接免疫荧光法，大鼠肝抗原片由本院免疫室制备，羊抗人IgG荧光抗体购自卫生部上海生物制品研究所；抗甲状腺球蛋白抗体及抗甲状腺微粒体抗体（TGA/TMA）测定采用放射免疫法，试剂购自卫生部上海生物制品研究所.用于测定自身抗体的血清收集后立即冻存于-20℃.②病毒学标志物检测：血清ALT测定采用赖氏法，试剂购自上海荣盛生物试剂厂；血清HBV标志物、抗HCV抗体和抗HGV抗体测定采用酶联免疫吸附试验（ELISA），试剂盒均购于洛阳华美生物工程公司；HCV-RNA检测采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR），试剂盒购自厦门长城生物工程公司.

　　统计学处理　以卡方检验进行统计学处理.

　　2　结果

　　与正常对照组比较，慢性HCV感染者抗GOR，ANA及TMA/TGA阳性率均明显增高（P＜0.01，表1）；与慢性HBV感染者比较，慢性HCV感染者抗GOR，ANA阳性率明显增高（P＜0.01，P＜0.05）.hCV感染者自身抗体阳性率与血清ALT水平及病毒复制有关，ALT增高者抗GOR及ANA阳性率均明显高于ALT正常者（表2），HCV-RNA阳性者抗GOR阳性率明显高于HCV-RNA阴性者（表3）.

表1　三组研究对象血清自身抗体阳性率的比较

表2　HCV感染者自身抗体阳性率与ALT的关系

表3　HCV感染者自身抗体阳性率与病毒复制的关系

　　　　aP＜0.05，vsHCV-RNA阴性组.3　讨论

　　HCV感染者多数呈慢性经过，造成持续性肝脏损害，一部分可发展为肝硬变和肝癌，但HCV的致病机制仍不清楚.迄今有多篇报道提示HCV感染可能引发自身免疫性反应［2，3］；一些自身免疫性肝炎或其他自身免疫性疾病如肾小球肾炎、桥本氏甲状腺炎等患者中抗HCV具有较高检出率［4，5］.pawlotskyetal［3］报告在慢性丙型肝炎患者中，肝外组织和自身免疫损害比较常见，在多数HCV感染的个体中可检出抗GOR抗体，GOR多肽是人体细胞核的一种成分，与丙肝病毒核心抗原有较大相似性，在HCV感染时，抗GOR既能识别宿主成分，同时可识别HCV的核心抗原引起自身免疫反应［6］.我们检测了HCV感染者66例血清抗GOR，ANA，TMA/TGA，和正常组比较，上述各种自身抗体的阳性率均显著增高，其中ALT增高者抗GOR及ANA阳性率显著高于ALT正常者，血清HCV-RNA阳性者抗GOR阳性率显著高于HCVrNA阴性者.说明HCV感染者抗GOR阳性率与ALT水平及病毒复制有关，提示HCV复制可促进自身免疫，自身免疫可引起肝功能损害.这一结果与Lohretal［7］及Quirogaetal［8］报道类似.tMA/TGA是甲状腺特异性自身抗体，本研究66例HCV感染者中，9例TMA/TGA阳性（女6例，男3例），与正常组相比P＜0.05，提示HCV感染能促进甲状腺自身抗体的产生，其可能原因不能排除甲状腺组织成分与HCV结构有部分相似性［9］.上述结果进一步证实，HCV感染者确实存在自身免疫现象.尽管在HCV感染若干年后部分病例病毒血症已不复存在，但由此产生的抗HCV仍可以和宿主蛋白发生交叉反应或自身抗体对自身成分的反应而发挥致病作用［10］.因此，我们认为，自身免疫在丙型肝炎肝细胞损伤中起重要作用，可能是慢性HCV感染的重要发病机制之一.

　　刘文恩，女，1962-05-17生，湖南省南县人，汉族.1987年湖南医科大学医疗系毕业，主治医生，博士生，主要从事病毒性肝炎的诊治研究，发表论文8篇.

　　通讯作者　刘文恩，410008，湖南医科大学附属湘雅医院传染科，湖南省长沙市.

　　Correspondenceto:LIUWen-En,DepartmentofInfectiousdiseases,XiangyaHospital,HunanMedicalUniversity,Changsha410008,Hunanprovince,China

　　4　参考文献

　　［1］　张艳，陆志檬，王耆煌，朱晓玲，崔大敷.丙型肝炎病毒感染相关自身抗体（抗GOR）测定及其临床意义.上海免疫学杂志，1993；13（5）：287-290

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　　［3］PawlotskyJM,Roudot-ThoravalF,SimmondsP,MellorJ,YahiaMB,Andrec.ExtrahepaticimmunologicmanifestationsinchronichepatitisCandhepatitiscvirusserotypes.AnnInternMed,1995;122:169-173

　　［4］Stehman-BreenC,AlpersCE,CouserWG,WillsonR.HepatitisCvirusassociatedmembranousglomerulonephritis.ClinNephrol,1995;44（3）:141-147

　　［5］TranA,QurantaJF,BenzakenS,ThiersV,ChauHT,HastierP.HighprevalenceofthyroidautoantibodiesinaprospectiveseriesofpatientswithchronichepatitisCbeforeinterferontherapy.Hepatology,1993;18:253-257

　　［6］MishiroS,HoshiY,TakedaK,YoshikawaA,GotandaT,TakahshiK.Non-A,non-Bhepatitisspecificantibodiesathost-derivedepitope:implicationforanautoimmuneprocess.Lancet,1990;336:1400-1403

　　［7］LohrHF,GrerkenG,MichelG,BraunHB,BuschenfeldeKHMZ.Invitrosecretionofanti-GORproteinandanti-hepatitisCvirusantibodiesinpatientswithhepatitisC.Gastroenterology,1994;107:1443-1448