实验性单纯疱疹性角膜炎中基质金属蛋白酶mRNA的表达

时间 : 2009-12-04 12:36:42 来源：cdmd.cnki.com.cn

[摘要]

单纯疤疹病毒角膜基质炎基质金属蛋白酶:RT- PCR

【摘要】：目的：研究Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-1）所致的角膜炎中基质金属蛋白酶（MMP-2，MMP-9）mRNA的表达，探讨MMP-2，MMP-9mRNA的表达与角膜基质炎病程变化的关系。方法：雌性BALB／c小鼠20只随机分为4组，每组5只，每只均取右眼为实验眼。除正常组外搔刮各组小鼠角膜上皮后点滴1型单纯疱疹病毒（HSV-1）诱发单纯疱疹性角膜炎（HSK）。裂隙灯下每日观察小鼠角膜变化并分别于感染后第2、7、14d处死小鼠，收集正常及感染后角膜。抽提角膜组织中总RNA，将RNA逆转录为cDNA后进行PCR扩增，扩增产物在琼脂糖凝胶中电泳，采用计算机凝胶成像系统提取图像并分析电泳条带灰度值。采用方差分析SNK-q检验对实验数据进行半定量分析。结果：感染后小鼠均可见典型的单纯疱疹性角膜炎表现，感染后2d见树枝状上皮缺损，继而发生浅层基质炎症，炎性细胞浸润，7d后角膜基质水肿，基质浸润，溃疡形成及新生血管形成，至14d逐步加重。除正常组5例标本MMP-9mRNA为阴性表达外其余各组均获得阳性目的片段。MMP-2，MMP-9mRNA的表达大体上随感染天数增加呈增高的趋势。其中MMP-2mRNA的表达在正常组与感染后第2d差异没有显著性（P＞0.05），感染后第7，14dmRNA的表达逐渐增高差异有显著性意义（P＜0.01）。MMP-9mRNA的表达在感染后2d、7d逐渐增高，14d表达达到最高值，但其中7d较第2d的增高差异没有显著性（P＞0.05），其余各组差异均有显著性意义（P＜0.01）。结论：在实验性单纯疱疹病毒性角膜基质炎中存在基质金属蛋白酶（MMP-2，MMP-9）mRNA的表达，且其表达随着角膜炎性反应的加剧，溃疡范围的扩大及新生血管的增加而逐渐增高。推测MMP-2，MMP-9mRNA的高表达参与了角膜溃疡，新生血管形成等病变的发生。