精索静脉曲张大鼠附睾线粒体钙线粒体与细胞质细胞色素C含量变化及细胞的凋亡 Changes

摘　　要:背景：精索静脉曲张可导致男性不育，探讨其机制对治疗男性不育有着重要意义。目的：分析外科所致的精索静脉曲张对大鼠附睾细胞线粒体钙、细胞色素C含量及附睾细胞凋亡和其显微、超微结构的影响。设计：随机对照实验。材料：实验于2003―06／2004―05在佳木斯大学完成。选取青春期雄性Wistar大鼠40只，体质量（220±20）g，室温下饲养1周后，随机分为假手术组、结扎组，每组20只。方法：假手术组显露左肾静脉建立假手术模型，结扎组部分结扎左肾静脉建立精索静脉曲张模型。术后10周，取双侧附睾，检测附睾头、体部细胞线粒体钙、细胞色素C含量及细胞质细胞色素C含量。以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡，常规制作附睾体部光镜、电镜标本，观察附睾组织细胞形态变化。主要观察指标：细胞线粒体钙、细胞色素C含量；细胞质细胞色素C含量；细胞凋亡；附睾组织细胞形态变化。结果：40只大鼠全部进入结果分析。①结扎组左右侧附睾细胞线粒体钙含量较假手术组显著降低[（4．72±1．45），（5．90±1．97），（10．13±2．34）mg／g，P〈0．011，②结扎组左右侧附睾细胞线粒体细胞色素C含量较假手术组线粒体组显著增高[（0.36±0．20），（0．19±0．14），（0．15±0．07）pmol／LP〈0．051。③结扎组左右侧附睾细胞胞质内细胞色素C含量较假手术组显著增高[（8．17±1．49），（7．48±1．60），（5．93±1．60）mol／L，（P〈0．05）④结扎组左右侧细胞凋亡率较假手术组显著增高[（13．3±1．9）％，（12．6±1．5）％，（6．2±0.3）％，P〈0．011。结扎组左右侧线粒体钙含量、细胞色素C、胞质细胞色素C、凋亡率差别均无显著性意义（P〉0．05）。⑤光镜下主要改变有附睾管萎缩，上皮细胞出现空泡化，上皮内晕、亮细胞数明显增多。⑥电镜下主要表现为主细胞内溶酶体增多、变大，残余小体增加，内质网扩张，线粒体嵴模糊，高尔基复合体空泡化；核染色质致密，形成大小不等的团块，边集于核膜处：上皮细胞游离面微绒毛稀少，可见局灶性断裂和破坏。结论：外科所致精索静脉曲张大鼠附睾组织细胞线粒体有损伤，使线粒体丧失储钙功能，同时细胞色素C通过线粒体外膜被释放进入胞质中，导致Caspase3激活，执行凋亡，使附睾组织细胞凋亡过度，其显微及超微结构明显改变，这些变化可能是影响精索静脉曲张患者生育能力的机制之一。