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融合表达淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒和卵清白蛋白CD8^＋T细胞表位的减毒鼠伤寒沙门氏菌

时间 : 2009-12-03 02:02:08 来源：www.cqvip.com

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[摘要]

依据淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)主要保护性抗原CD8^+T细胞表位VRRPQASGVYMGNLTAQ和卵清白蛋白(OVA)CD8^+T细胞表位SIINFEKL,设计、合成两条编码LCMV和OVACD8^+T细胞表位的寡核苷酸片段，经退火后，克隆人绿色荧光

摘　　要:依据淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）主要保护性抗原CD8^+T细胞表位VRRPQASGVYMGNLTAQ和卵清白蛋白（OVA）CD8^+T细胞表位SIINFEKL,设计、合成两条编码LCMV和OVACD8^+T细胞表位的寡核苷酸片段，经退火后，克隆人绿色荧光蛋白表达质粒pYAGFP，经PCR扩增和序列测定分析，证实成功构建T细胞表位与绿色荧光蛋白融合表达的重组质粒pYAGFPL-O，将此重组质粒pYAGFPL-O转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550，获得重组沙门氏菌X4550（pYAGF-PL-O）。用SDS-PAGE电泳测得重组菌表达的融合蛋白约为30kD.同时，荧光显微镜下观察到X4550（pYAGFPL-O）发出黄绿色荧光。这些结果表明LEMV和OVAT细胞表位已成功表达。重组菌X4550（pYAGFPL-O）的获得为研究沙门氏菌载体携带外源抗原的T细胞应答规律及调控机理打下了重要基础。
关键词: 绿色荧光蛋白 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 卵清白蛋白 T细胞表位 减毒鼠伤寒沙门氏菌 融合表达淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒和卵清白蛋白CD8^＋T细胞表位的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建与鉴定
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