盐酸戊乙奎宁对小鼠围生期毒性研究

作者：王爱平　李海艳　张清林　黄春倩　王治乔

【关键词】盐酸戊乙奎宁

【摘要】目的了解药物对母鼠的妊娠、分娩和胎儿的生长发育、神经行为等方面的影响。方法盐酸戊乙奎宁设2.5、12.5、62.5mg/L，并设计了自来水对照组，于孕期第15天饮水给药至断奶止，给药32天。结果在62.5mg/L组除见到仔鼠的存活率、耳廓分离、出毛和睁眼有明显影响外，未见到明显的母鼠毒性和行为致畸胎作用。结论2.5mg/L约相当人临床用量的15倍，12.5mg/L约相当人用量的75倍，62.5mg/L相当于人用量的375倍。在此剂量范围内和实验条件下，没有见到盐酸戊乙奎宁对母鼠明显的毒性和行为致畸胎作用。

　　【关键词】盐酸戊乙奎宁;行为致畸胎围生期实验指在围生期和哺乳期给药，目的是了解药物对母鼠的妊娠、分娩和胎儿的生长发育、神经行为等方面的影响。盐酸戊乙奎宁（peuequiuehydrochloride）是军事医学科学院毒物药物研究所合成的一类新药，它的药理作用是治疗有机磷中毒。在致畸胎研究中，30mg/kg以上时对母体和胎儿有一定的毒性作用［1］。为评价该药的安全性，我们对盐酸戊乙奎宁进行了小鼠围生期毒性实验。

　　1材料与方法

　　1．1动物选择实验动物中心繁殖的AMS纯系小鼠，鼠龄80天，性成熟未交配的健康小鼠，用实验动物中心配制的块料喂养，室温控制在（24±1）℃，湿度保持在50%～60%，实验室定时通风、消毒，保持饲养盒内干燥。在实验室检疫2周，雌鼠体重24～28g，雄鼠体重28～32g，按1∶1同笼交配，查到阴栓之日定为妊娠第0天，将阴栓阳性雌鼠随机分入各实验组和对照组中。

　　1．2药物盐酸戊乙奎宁由毒物药物研究所合成室提供，批号890426，乳白色粉末，样品于4℃冰箱保存，在水中较稳定。

　　1．3剂量及分组设计剂量为2.5、12.5、62.5mg/L3个剂量组，同时设溶剂对照组。将上述不同浓度组药物分别溶于自来水中，供小鼠自由饮用，小鼠口服吸收速度与注射吸收速度相当［2］。临用时配制，每3天换水1次，并记录每组饮水量。孕期第15天开始给药至断乳止，共给药时间为32天。

　　1．4观察指标定期称母鼠体重，观察摄食量、饮水量及一般健康状况。母鼠分娩当天记为出生后第0天。记录每窝活胎数、死胎数、畸胎数、性比。出生后第4天每窝留8只仔鼠，去除多余仔鼠。于出生后第0、4、7、14、21、32天称仔鼠体重，观察仔鼠生长发育。统计仔鼠出生后第4天的存活率和断乳存活率。于出生后第55天每组处死20只仔鼠（雌雄各半），检查心、肝、脾、肺、肾、睾丸、子宫，称重，计算脏体系数。检查记录仔鼠发育成熟指标，观察仔鼠张耳、睁眼、爬行、门齿萌出等达标时间［3］。神经行为实验：于出生后不同时间检查平面翻正、负趋地性、悬崖回避、触须定位、视觉定位、睾丸下降、阴道张开及游泳衰竭时间等，上述各项指标具体操作方法参见文献［3］。仔鼠体重以窝为单位，生长发育指标及神经行为实验均以只为单位。

　　2结果与讨论

　　2．1盐酸戊乙奎宁对母鼠饮水量及生殖功能的影响盐酸戊乙奎宁给药后，对孕鼠未见到明显的不良影响，一般状况良好，无中毒死亡发生。在高浓度组中见到孕鼠摄食量稍减等轻微的中毒现象。

　　2.1.1盐酸戊乙奎宁对孕鼠饮水量的影响见表1。

　　表1围生期和哺乳期给药母鼠日平均饮水量（略）

从表1可见随着给药浓度的增高，孕鼠日平均饮水量逐渐减少，但实际累积量均在所设计的剂量水平，高剂量组62.5mg/L累积剂量为1.6LD50。给药后对母鼠体重增长有轻微的抑制作用，与溶剂对照组相比没有见到明显差别。

　　2.1.2盐酸戊乙奎宁对孕鼠生殖功能的影响见表2。经统计处理孕鼠各项生殖功能指标与对照组比较均没有见到明显的差别，各组均见到部分母鼠食仔现象，与溶剂对照组相比差异亦无明显差别，说明盐酸戊乙奎宁对母鼠的生殖功能影响不大。

　　2．2盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠生长发育的影响

　　2.2.1对F1仔鼠生长发育的影响见表3。在高浓度组（62.5mg/L）F1仔鼠出生存活率与对照组相比（经χ2统计处理,P＜0.01）差异有非常显著性，说明盐酸戊乙奎宁在高浓度时对仔鼠的存活率有一定的影响。2.5mg/L组仔鼠哺乳存活率与对照组相比差异有显著性（P＜0.05）。

　　2.2.2盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠体重的影响见表4。各浓度组与溶剂对照组相比均没有见到明显的差别，说明盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠体重无明显影响。

　　2.2.3盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠生理发育成熟指标的影响见表5。12.5mg/L、62.5mg/L组耳廓分离时间与溶剂对照组相比经统计学处理差异有非常显著性（P＜0.01）。

　　表2盐酸戊乙奎宁围生期给药对母鼠生殖功能影响　略

　　表3盐酸戊乙奎宁对仔鼠生长发育的影响　略

　　表4围生期和哺乳期口服盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠体重的影响（略）

　　表5盐酸戊乙奎宁对仔鼠生理发育成熟指标的影响（略）

62.5mg/L组F1仔鼠出毛与对照组比较差异有非常显著性（P＜0.01）。盐酸戊乙奎宁高剂量组F1仔鼠睁眼时间与对照组相比差异亦有非常显著性，说明高剂量的盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠生理发育有明显的影响。除此以外，12.5mg/L组F1雄鼠睾丸下降时间比溶剂对照组明显延长，2.5mg/L和12.5mg/L组雌鼠阴道张开时间也明显比溶剂对照组延长。

　　2.2.4盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠脏器重量的影响见表6、表7。从表6可见盐酸戊乙奎宁各浓度组其F1雄仔鼠脏器重量系数与溶剂对照组相比差异无显著性（P>0.05）。由表7可见对雌性仔鼠脏器重量有影响。2.5mg/L组雌鼠心脏重量与溶剂对照组比较差异有显著性（P＜0.05），而其他各实验与溶剂对照组相比未见到明显差别。

　　表6盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠（雄）脏器重量的影响（略）

　　表7盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠（雌）脏器重量的影响（略）

　　2．3盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠神经行为发育的影响

　　2.3.1盐酸戊乙奎宁对仔鼠神经反射行为发育的影响见表8、表9。各剂量组神经反射行为与溶剂对照组相比未见明显差别，说明盐酸戊乙奎宁对仔鼠神经行为无明显影响。

　　表8盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠反射行为发育的影响（略）

　　表9盐酸戊乙奎宁对仔鼠平面翻正反射的影响（略）

　　2.3.2盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠游泳能力测试结果见表10。各剂量组取出生后60日龄小鼠10只（雌雄各半），采用直径30cm、高20cm玻璃缸，水深18cm，水温18℃，分别将动物投入水中，记录从把动物放入水中至头部完全淹没在水下10s的时间。从表10可见12.5mg/L组雄鼠与对照组相比差异有显著性（P＜0.05）。其他各组与溶剂对照组相比差异均无显著性。

　　表10盐酸戊乙奎宁对仔鼠游泳能力检查结果（略）

　　2.3.3盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠受孕率的影响见表11。各剂量组取80日龄雌鼠20只，雄鼠10只，雌雄以2∶1同笼交配2周，处死雌鼠检查受孕率，各组仔鼠受孕率均在正常范围，与对照组相比差异无显著性。

　　表11盐酸戊乙奎宁对F1仔鼠受孕率的检查结果（略）

　　2.4实验设计的主要依据见表12。我们主要根据人临床用药剂量并参考LD50量，我们设计的低剂量2.5mg/L约相当人临床用量的15倍，12.5mg/L约相当人用量的75倍，62.5mg/L相当于人用量的375倍。在此剂量范围内和实验条件下，没有见到盐酸戊乙奎宁对母鼠明显的毒性和行为致畸胎作用。

　　表12盐酸戊乙奎宁分组与剂量设计　略

　　【参考文献】

　　1张清林.盐酸戊乙奎宁对大鼠致畸胎研究.六所内部资料，1990.

　　2袁淑兰.小鼠口服盐酸戊乙奎宁后的药代动力学.六所内部资料，1992.

　　3王爱平.小鼠三段生殖毒性实验方法的建立.六所内部资料，1990.

　　作者单位：1100050北京,中国医学科学院中国协和医科大学新药安全评价研究中心