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中国莱姆病螺旋体宿主动物的初步调查研究

时间 : 2009-12-02 06:23:02 来源:www.yxlw.org

[摘要]

万康林 张哲夫 王宏英 侯学霞 张金声   摘要 为对中国莱姆病螺旋体的宿主动物有所了解,于1987~1997年间,作者在中国16个省(市、区)的山林地区,采用血清流行病学和病原学研究方法,对牛、羊、狗、野兔和

万康林 张哲夫 王宏英 侯学霞 张金声

  摘要 为对中国莱姆病螺旋体的宿主动物有所了解,于1987~1997年间,作者在中国16个省(市、区)的山林地区,采用血清流行病学和病原学研究方法,对牛、羊、狗、野兔和野鼠进行了莱姆病的调查研究。结果显示在我国至少有牛、羊、狗、野鼠、野兔等5种动物中有莱姆病的感染存在。牛、羊和狗的感染率分别为18.18%~32.61%、17.12%~61.21%和38.50%~60.00%。狗作为我国北方林区莱姆病螺旋体的主要生物媒介全沟硬蜱成虫的主要供血者之一,可能是较重要的宿主动物。从黑线姬鼠、棕背FDA1、花鼠、白腹鼠、社鼠、褐家鼠、针毛鼠、白腹巨鼠和华南兔等动物分离出20株莱姆病螺旋体,尤其是从黑线姬鼠和白腹巨鼠的胎鼠分离到莱姆鼠病螺旋体,证实莱姆病螺旋体可通过胎盘垂直传播,这对莱姆病自然疫源地的维持和扩大有重要意义。野鼠的感染率在41.18%~86.05%间。血清学和病原学调查结果证实黑线姬鼠和棕背FDA1是中国莱姆病螺旋体的重要储存宿主。
  关键词 莱姆病 莱姆病螺旋体 储存宿主 黑线姬鼠 棕背FDA1
  中图分类号 R181.81 R377

Preliminaryinvestigationonreservoirhosts
ofborreliaburgdorferiinChina

WanKanglin,ZhangZhefu,WangHongying,HouXuexia,etal.
InstituteofEpidemiologyandMicrobiology,ChineseAcademyofProventiveMedicine,Beijing102206,China

  From1987to1997,thereservoirhostsofBorreliaburdorferi(B.b.)wereinvestigatedin16provinces,municipalitiesandautonomousregionsofChina.Seroepidemiologicalfindingsindicatedthatcattle,sheep,dogsandratsfromforestareashadahighantibodytiterforB.b.(B31)withpositiveratesof18.18%~32.61%,17.12%~61.21%,38.50%~60.00%and41.18%~86.05%respectively.UsingBSKmedium,20strainsofB.b.wereisolatedfromApodemusagrarius,Clethrionomysrufocanus,Eutamiassibiricus,Rattuscoxingi,Rattusnorvegicus,Rattusedwardsi,Rattusconfucianus,RattusfulvescensandCaprolagussinensis.ThesespirochetalstrainswereidentifiedasB.b.byindirectimmunofluorescenceassayusingspeciesandgenusspecificmonoclonalantibodies.VerticaltransmissionofB.b.wasconfirmedwithB.b.isolatedfromfoetusesofApodemusagrariusandRattusedwardsi.Theresultsshowedthatlymediseasespirochetes,B.b.,mightbenaturallymaintainedinanenzooticcyclebytransplacentaltransmission.ApodemusagrariusandClethrionomysrufocanusmightserveasmajorreservoirhostsforB.b.inChina.
  Keywords:lymedisease,borreliaburgdorferi,reservoirhost,apodemusagrarius,clethrionomysrufocanus

  莱姆病螺旋体(即伯氏疏螺旋体,Borreliaburgdorferi)是新发现的人兽共患病——莱姆病(LymeDisease)的病原体[1,2],主要是通过某些硬蜱的吸血活动在动物间传播,人被携带有螺旋体的蜱叮咬而感染。美国已从多种动物和鸟类分离到本病原体,并认为白脚鼠和白尾鹿是最重要的动物宿主[3]。在我国,1991年万康林等首次从白腹鼠(Rattuscoxingi)分离到莱姆病螺旋体[4],发现我国莱姆病螺旋体的主要宿主动物可能是某些小型啮齿动物。1987~1997年间,在进行中国莱姆病的调查时,为明了我国莱姆病螺旋体的主要宿主动物,我们在黑龙江、内蒙古等16个省(市、区)进行了调查研究。

1 材料和方法

1.1 动物标本
  1987~1997年间,在内蒙古、黑龙江、辽宁、河北、宁夏、贵州、福建、云南、广东、湖北、河南、山东、四川、江苏、安徽、湖南等16个省(市、区)的山林地区收集。采用鼠夹、鼠笼和电猫等捕获野鼠,收集血清进行抗莱姆病螺旋体抗体(IgG)检测,取脏器(心、肾、膀胱等)分离病原。捕获野兔,取脏器(心、肾、膀胱等)分离病原。对牛、羊、狗等动物,收集血清进行抗莱姆病螺旋体抗体(IgG)检测。
1.2 血清抗体(IgG)检测
  间接免疫荧光抗体法(IFA)和间接酶联兔疫吸附试验(ELISA),抗原用美国标准参照菌株B31(美国CDC的Linnan博士赠送),制备抗原,血清抗体(IgG)检测和结果判断依据参考文献[5,6]。
1.3 病原体分离培养
  取野兔、野鼠及孕鼠体内胎鼠脏器(心、肾、膀胱等)米粒大小块接种BSK培养基,33℃培养,7天后检查,每周检查1~2次。
1.4 菌株纯化和鉴定
  对新分离到的伴有杂菌生长的螺旋体培养物用微孔滤膜滤过法进行纯化[7]。菌株鉴定,采用对莱姆病螺旋体型属特异的单克隆抗体H5332、H6831和H9724(针对美国B31菌株,美国Schwan博士赠送),间接荧光抗体法鉴定[8]。
1.5 试剂
  兔抗鼠、牛、羊和狗的IgG荧光抗体、辣根过氧化物酶标记的兔抗鼠、牛、羊和狗的IgG抗体、BSK培养基、B31抗原片和超声全菌抗原由中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所制备。

2 结果

2.1 标本收集
  我们在上述16个省(市、区)的山林地区收集到各种动物标本共2108份。其中野鼠1024只,从中采集鼠血清200份,胎鼠120只;野兔10只;牛血清290份;羊血清419份;狗血清175份。
2.2 血清学检查结果
  血清流行病学方法调查显示我国山林地区多种动物中有莱姆病的感染存在。不同种动物、不同地区来源的同种动物间的感染率均存在明显的差异(详见表1)。不同的鼠种间莱姆病的感染率也存在较大的差异,其中以黑线姬鼠和棕背FDA1的感染率高,分别为80.00%(40/50)和68.00%(17/25),且这两种鼠是我国东北林区的优势鼠种。

表1 不同动物血清抗莱姆病螺旋体抗体(IgG)结果


动物来源检查数阳性数阳性率(%)
羊安 徽(山区)116
71
61.21
羊安 徽(平原)811822.22
羊宁 夏(山区)2223817.12
牛安 徽(山区)1384532.61
牛安 徽(平原)551018.18
牛宁 夏(山区)671623.88
牛广 东(山区)30723.33
狗安 徽(山区)20630.00
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