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融合表达淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒和卵清白蛋白CD8<'+>T细胞表位的减毒鼠伤寒沙门

时间 : 2009-12-02 14:59:28 来源:scholar.ilib.cn

[摘要]

依据淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)主要保护性抗原CD8<'+>T细胞表位VRRPQASGVYMGNLTAQ和卵清白蛋白(OVA)CD8<'+>T细胞表位SIINFEKL,设计、合成两务编码LCMV和OVACD8<'+>T细胞表位的寡核苷酸片段,经退火后,

依据淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)主要保护性抗原CD8<'+>T细胞表位VRRPQASGVYMGNLTAQ和卵清白蛋白(OVA)CD8<'+>T细胞表位SIINFEKL,设计、合成两务编码LCMV和OVACD8<'+>T细胞表位的寡核苷酸片段,经退火后,克隆入绿色荧光蛋白表达质粒pYAGFP,经PCR扩增和序列测定分析,证实成功构建T细胞表位与绿色荧光蛋白融合表达的重组质粒pYAGFPL-O,将此重组质粒pYAGFPL-O转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550,获得重组沙门氏菌X4550(p)YAGFPL-O).用SDS-PAGE电泳则得重组菌表达的融合蛋白约为30KD.同时,荧光显微镜下观察到X4550(p)YAGFPL-O)发出黄绿色荧光.这些结果表明LCMV和OVAT细胞表位已成功表达.重组菌X4550(p)YAGFPL-O)的获得为研究沙门氏菌载体携带外源抗原的T细胞应答规律及调控机于打下了重要基础.
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