② 28株:系将上述1217株经紫外线进一步减毒,再经乳鼠皮下传代,提高其皮下增殖力和免疫原性而育成的弱毒疫苗株。此株在给乳鼠作脑内注射时,死亡率为75%,皮下注射时引起50%的死亡率。3周龄小鼠在脑内注射时基本上不死亡,皮下注射后病毒不能入脑。经乳鼠脑内连续传代,毒力回升不明显。给小鼠作一次皮下免疫注射,保护力可达70对数以上。大规模的马群免疫试验(13万余匹)证明安全。免疫后1个月,中和抗体的阳转率达85%左右。流行病学调查证明,疫苗注射组的发病率为23/10万,而未注射对照组的发病率为1721/10万,保护率为867%。目前通用仓鼠肾细胞培养疫苗。试用28株接种小鼠,待其发病后采脑制苗,注射马骡和猪,也取得良好的免疫效果。 曾用鼠脑和仓鼠肾培养的28株给4万多匹马进行免疫注射,仅极少数发生轻度局部
肿胀、低烧和
食欲减退,未见其它不良反应。 敖坚等应用另一弱毒蚀斑株――142株在BHK21细胞上制造弱毒疫苗。用以给妊娠母猪进行免疫注射,未见不良反应。接种后的中和抗体阳转率为80%~100%,
死产率显著下降。 在上述弱毒疫苗株的基础上,又曾育成一些新的弱毒株,例如将53株通过鸡胚、仓鼠肾细胞交替传代3次,再在鸡胚细胞上挑斑(蚀斑),育成所谓的鸡53株等等。由于液体活疫苗在4℃的有效期仅2~3个月,而冻干保存时又易在干燥过程中使疫苗效价下降,因此必须积极研究弱毒疫苗的保存方法,以利推广应用。 幼畜可由初乳获得被动免疫――母源抗体。具有被动免疫的幼畜,在用弱毒疫苗接种后不易产生主动免疫。为保证有效免疫力的产生,活疫苗接种应在幼驹出生后2~4个月进行,幼猪也应在出生后2个月以上开始接种。 日本曾用井上等育成的减毒M株于猪的预防接种。 (3) 基因工程疫苗: Konishi等在1994年以禽痘病毒作为载体分别表达了JEV的preM、E和NS1基因以及preM和E基因;重组病毒免疫小鼠,能抵抗致死剂量JEV的攻击。Konishi等于1992年在一个高度致弱的痘苗病毒株NYVAC表达了JEV的preM、E和NS1基因,以108PFU的重组病毒免疫猪,7天后血清中出现JEV中和抗体及血凝抑制抗体,28天后注射第二个剂量的重组病毒,血清中和抗体效价增高。在用2×105PFUJEV攻击后,已接种重组病毒的猪血清中JEV水平显著降低。活载体疫苗与常规疫苗相比,有着一定的优势,有望代替常规疫苗的应用。上一篇:
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