前言9号和22号染色体相互易位形成融合基因bcr／abl，是慢性粒细胞性
白血病（CML）的主要发病机制。bcr／abl所编码的融合蛋白p210~（BCR/ABL）具有异常增高的酪氨酸激酶活性，与白细胞的恶性转化密切相关。研究发现，bcr／abl融合基因中bcr基因第一外显子（即bcr／abl的第一外显子bE1）所编码的肽段为激活原癌蛋白c―ABL的酪氨酸激酶活性所必需。本课题拟利用定点打靶系统Cre／loxP系统作用原理，通过同源重组将loxP序列引入CML细胞系K562基因组的bE1两侧，并通过调控Cre酶的表达调控细胞内bE1基因的敲除过程，观察bE1敲除后K562细胞在生长、转移及致癌性等方面的变化，从而为深入阐明CML的发病机理、演变过程、改善治疗方案及估计预后提供有力的理论依据。我们首先通过四方面的实验全面分析和检验了我们所采用的基因打靶体系的有效性：1）利用染色体检查和核型分析检测了K562细胞内染色体的数目和特点，同时采用原位荧光杂交（FISH）测定了细胞内bcr／abl融合基因的拷贝数和分布情况。染色体检查和核型分析结果显示，K562细胞核内有67～69条染色体，其中22条染色体...
Chronicmyeloidleukemia（CML）ischaracterizedbythereciprocaltranslocationofchromosome9;22,whichcausedthebcrgeneonchromosome9fusedtotheablgeneonchromosome22.IthasbeenreportedthatproteinsencodedbyBcr/AblfusiongenehadconstitutivekinaseactivityandwasthemaincauseofCML.Furtherstudiesshowedthatspecificdomainscodingbythefirstexonofbcrgeneinbcr/abl（bE1）playedakeyroleintheactivationofproto-oncoproteinc-Abl.Therefore,itisnecessarytoexplore...
