依达拉奉对脓毒性休克大鼠心肌细胞损伤的作用

AbstractAIM：Toinvestigatetheeffectofedaravone，anovelfreeradicalscavenger，oncardiacfunctionandmyocardialcellinjuryinratswithsepticshock.METHODS：AftertreatmentwiththreedifferentdosesofEDtorats1haftersepticshock，changesofMAP，LVESP，LVEDP，±dp/dtmaxweredeterminedin4differenttimephases.TheactivitiesofSOD，CAT，LDHandtheconcentrationsofMDA，LDinmyocardialtissueweremeasured.ThepathologicchangeofmyocardialtissuewasobservedbyHEstaining.RESULTS：Comparedwithsepticshockgroup，MAP，LVESPand+dp/dtmaxwereincreasedremarkablyinEDtreatmentgroups.TheactivitiesofSODandCATandtheconcentrationofMDAinEDgroupswereclosetothoseinnormalcontrolgroup.Histologicalexaminationshowedcongestion，edemaandinflammatorycellinfiltrationinmyocardialtissue，whileEDtreatmentattenuatedtheabovepathologicalchangesofmyocardium.CONCLUSION：EDhasasatisfyingtherapeuticeffectoncardiacdysfunctioninratswithsepticshock，whichmayberelatedtoattenuatingmyocardialinjury.

Keywordsedaravone;Oxygenfreeradicals;shock，septic;Myocardialinjury

摘要目的：观察氧自由基清除剂依达拉奉对脓毒性休克大鼠心脏功能和心肌损伤的作用.方法：在大鼠脓毒性休克后1h用3个剂量ED治疗，测定休克后4个时相点平均血压、左室收缩末期压力、左室舒张末期压力、左室压力上升及下降最大变化速率等心功能指标；取心肌组织测超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、乳酸脱氢酶活性和乳酸、丙二醛含量，并观察形态学改变.结果：与脓毒性休克组比较，ED可显著升高MAP，LVESP和±dp/dtmax，并使SOD，CAT活性增强以及MDA浓度降低接近对照组；组织学观察可见模型组心肌充血、水肿及炎性细胞浸润等，ED可明显改善以上形态学变化.结论：ED具有抗脓毒性休克心功能不全的作用，其机制与减轻心肌损伤有关.

关键词依达拉奉；氧自由基；休克，脓毒性；心肌损伤

心功能不全和心肌细胞损伤是脓毒性休克的主要致命性并发症，有40%的脓毒症患者出现左、右心功能不全［1-2］.脓毒症时菌体膜产生的内毒素入血可直接或间接通过细胞因子和自由基的作用引起心肌损伤和心功能不全［3］，实验证实抗氧化剂谷胱甘肽加N乙酰半胱氨酸可明显减少脓毒症休克患者血液中活性氧浓度，改善心功能指数［4］.依达拉奉［edaravone，ED，3甲基1苯基2吡唑啉5酮］是新型强效的自由基清除剂，是临床治疗缺血性脑卒中的有效药物［5］.我们通过观察ED对脓毒性休克大鼠心功能、心肌氧自由基和心肌病理学变化的影响，旨在为该药治疗脓毒性休克提供理论依据.

1材料和方法

1.1材料Wistar大鼠60只，雌雄各半，体质量g；LPS；ED注射液；2002年美国FDA批准的抗重症感染药XigrisTM；乳酸、乳酸脱氢酶、过氧化氢酶、丙二醛、超氧化物歧化酶试剂盒；DU7500分光光度仪；Powerlab/8SP多功能生理记录仪；BX50显微镜；江苏捷达801病理医学影像系统.

1.2.1动物分组及病理模型复制将大鼠分为6组，每组10只.对照组：仅作手术对照并给予生理盐水；模型组：尾静脉注射LPS，8mg/kg致内毒素休克后单纯给予等体积生理盐水；阳性药对照组：以XigrisTM为阳性药对照，根据临床剂量换算剂量为19.34mg/kg；ED高、中、低剂量组：给予ED的剂量分别为1.6，0.8，0.4mg/kg.在LPS复制脓毒性休克模型后1h行药物治疗.戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉，右颈总动脉插管至左心室，左股动脉导管接血压计检测平均动脉压，左股静脉导管用于给药和输液.

1.2.2心功能检测指标将左心室导管连接8道生理记录仪，应用ChartV4.1.2信号处理软件记录左室收缩末期压力，左室舒张末期压力和左室压力上升及下降最大变化速率.记录LPS注射后0，2，4，6h心功能指标.

1.2.3心肌氧自由基测定在LPS后6h心功能指标测完后，开胸取左心室两块0.5g组织，取其一用冰PBS冲洗干净，在PBS烧杯中剪碎及冰浴下匀浆，匀浆液在4℃下4000r/min离心15min，上清按试剂盒说明书应用分光光度仪检验LD，LDH，CAT，MDA及SOD含量.

1.2.4心肌病理学观察取上步骤中另一块心肌经100mL/L多聚甲醛固定，乙醇梯度脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，连续冠状切片，切片厚度4μm，HE染色，显微镜下观察并留存图像.

统计学处理：计量资料表示为x±s，用统计学软件SPSS11.0的ANOVA法比较组间差异的统计学意义.