神经胶质瘤的反义治疗研究进展神经外科学 | 39康复网 | 医源世界

时间 : 2009-11-30 03:12:54 来源：www.39kf.com

[摘要]

神经胶质瘤的反义治疗研究进展属于神经外科学栏目，主要讲述了神经胶质瘤为中枢神经系统常见肿瘤，目前所有治疗措施(如：手术切除、化学治疗、放射治疗和免疫治疗等)的疗效和应用潜力都极为有限，近年来，随着分子生

　　神经胶质瘤肿瘤，目手术切除、化学治疗、放射治疗和免疫治疗等）的疗效和应用潜力都极为有限，近年来，随着分子生物学的研究进展，反义基因治疗脑瘤，尤其是神经胶质瘤，取得了飞速的发展，细胞培养和动物实验均取得令人振奋的成果，从而为神经胶质瘤的病因治疗开辟了新的道路［1］

　　一、反义基因治疗概述

　　目前认为肿瘤的发生与原癌基因的激活和抑癌基因的失活有关。原癌基因与抑癌基因都是正常细胞内正常存在的基因，它们编码的产物

　　反义基因治疗依据碱基互补原理，应用能与目的基因或其mRNA互补的核酸，通过空间阻遏作用，或诱导RNaseH活性，或与目的DNA双股螺旋形成三聚体（triplehelix），在基因复制、转录、剪接、mRNA转运及翻译水平上，抑制蛋白质合成的特性，抑制癌基因的表达，抑制生长因子的分泌或封闭其受体，以期阻断癌细胞内的异常信号传导及自分泌和旁分泌环路，使癌细胞进入正常化轨道或引起癌细胞凋亡［2］。反义核酸包括反义核糖核酸（antisenceRNA）、核糖酶（ribozyme）和反义寡核苷酸（antisenseoligodeoxynucleotides,AONs）三类。

　　1.反义核糖核酸：反义RNA是将特异的反义基因连到特定的表达载体（质粒、病毒），并导入靶细胞的相应mRNA的基因位点上反向转录形成的RNA，它的一级结构与相应的mRNA高度互补，从而能形成RNA双链杂交分子。这

　　2.核糖酶：Ribozyme是一类天然的、具有酶催化活性和自我剪切功能的RNA，它由双臂及其中间的锤头两部分构成，其两臂与目的RNA互补，相当于一种反义RNA，中间的锤头为催化部位，一旦两臂与目的RNA结合，则催化部位即将目的RNA中敏感的磷酸二酯键切断降解，阻止翻译过程［3］。

　　3.反义寡核苷酸：AONs及其衍生物是一些人工合成的反义核酸，均为小分子物质，一般由15～21癌症的目的［2］。由于其具有分子量小、易于人工合成、基本无毒、在细胞内与靶RNA形成杂交体的Tm值低等优点，故成为反义核酸中广为使用的重要类型。然而，未经修饰的磷酸二酯AONs对核酸酶敏感，易被快速降解，故半衰期很短，仅为几小时，甚至不足15分钟［4，5］。此外，由于其磷酸骨架带负电荷，难于穿越细胞膜，故细胞穿透能力较差［6］。为提高AONs的稳定性，延长半衰期和增加细胞穿透能力，学者们采用化学修饰的方法已研制出多种AONs的衍生物，如：甲基磷酸AONs［4］，硫代磷酸AONs［3］，α-AONs［6］，结合型AONs［7］等。为使AONs顺利进入靶细胞发挥治疗作用，靶向性转运至关重要。直接注射存在AONs易降解、细胞摄取率不高、非特异性结合降低了AONs的药效以及对mRNA的非特异性阻断等诸多问题。为此，人们试用以下方法改善靶向性转运。（1）将AONs与转铁蛋白/多聚L-赖氨酸复合物连接，以增强其生物效应；（2）AONs与带正电荷的脂类形成复合物，以克服磷酸骨架负电荷所致的穿越细胞膜的困难；（3）用脂质体包裹AONs后介导进入细胞，既有利于大分子的顺利进入又免受细胞外各种酶的水解作用；（4）AONs与胆固醇结合使其胞浆保持时间增加10倍；（5）用免疫脂质体转运AONs可使其特异性转运至靶组织和靶细胞；（6）将AONs体外转染给转载细胞（如成纤维细胞）也可较好地将AONs载入靶细胞内；（7）电打孔（electroporation），即借助于电流将AONs导入靶细胞［6，8］。

　　二、神经胶质瘤的反义治疗

　　近年来，神经胶质瘤的反义治疗已取得许多可喜的成果。