CD44Ｖ6 基质金属蛋白酶及其抑制因子在子宫内膜增殖症中的表达及意义

【摘要】目的研究子宫内膜增殖症组织中CD44V6、基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制物：组织金属蛋白酶抑制剂TIMP-1、TIMP-2的表达，探讨它们在子宫内膜不典型增生诊断、治疗中的价值。方法应用免疫组化二步法对子宫内膜增殖组及对照组的子宫内膜组织中CD44Ｖ6、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达进行研究、分析。子宫内膜增殖组共92例，其中单纯性增生24例，复杂性增生26例，不典型增生42例；正常增生期子宫内膜共23例。结果在不同的病理分型中随组织细胞异型性的增加，CD44Ｖ6、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2阳性表达率均增加。对不典型增生组中该五指标的阳性表达进行Spearman相关性分析，它们的阳性表达强度之间存在正相关。结论推测它们可能相互作用共同促进细胞过度增殖，从而导致肿瘤的形成和进展。

【关键词】子宫内膜增殖症免疫组织化学CD44Ｖ6基质金属蛋白酶组织金属蛋白酶抑制剂

　　【Abstract】ObjectiveToanalyzetheexpressionofCD44Ｖ6,MMP-2,MMP-9andtheirinhibitorTIMP-1,TIMP-2intissueofendometrialhyperplasia,thentoinvestigatetheirclinicalvalueindiagnoseandtreatmentinatypicalhyperplasiaofendometrium（AH）.MethodsImmunohistochemistrytechniquewasusedtodetectCD44Ｖ6,MMP-2,MMP-9,TIMP-1andTIMP-2expressioninEHgroupandcontrolgroup.InEHgroup,therewere24casesofsinglehyperplasia,26casesofcomplexhyperplasiaandand42casesofatypicalhyperplasia.ResultsThepositiverateofCD44Ｖ6,MMP-2,MMP-9,TIMP-1,TIMP-2weredifferentinvarioustypesofEH.TheexpressionofCD44Ｖ6、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2hadastrikingpositivecorrelationwiththeheteromorphismincellsandtissueofAHusingSpearmancorrelationanalysis.ConclusionCD44Ｖ6、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2mightworktogetherplayanimportantroleinEndometrialHyperplasia,whichmightberelatedwithtumorformation.

　　【keywords】EndometrialHyperplasiaImmunohistochemistryCD44VMatrixmetalloproteinase（MMPs）Tissueinhibitorsofmatrixmetalloproteinases（TIMPs）　　子宫内膜增殖症是指发生在子宫内膜的一组增生性病变。CD44Ｖ6与肿瘤细胞的成瘤性、侵袭性及转移性密切相关。基质金属蛋白酶（MMPs）可以降解细胞外基质和基底膜，还可以通过促进细胞增殖、新生血管形成，调节凋亡以及细胞粘附，促进肿瘤细胞的发生、浸润和转移。MMP-2、MMP-9是其中的成员。TIMPs作为MMPs的天然抑制物，可抑制MMPs对细胞外基质的降解。作者采用免疫组化二步法，对子宫内膜从正常增生期→单纯性增生→复杂性增生→不典型增生组织中CD44Ｖ6、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达及相互关系进行研究，探讨各指标在子宫内膜细胞增殖及恶变发生发展中所起的作用。

　　1材料与方法

　　1.1一般材料

　　选择自2001年1月至2005年11月在温州医学院附一医院就诊病例，随机抽取临床、随诊资料及临床病理资料完整的子宫内膜增殖症患者92例，经诊断性刮宫病理科存档子宫内膜组织标本蜡块。该92例设为观察组，其中子宫内膜单纯性增生24例（第2组），复杂性增生26例（第3组），不典型增生42例（第4组）。所有病例和标本要求满足以下条件：（1）经10%福尔马林溶液固定，组织包埋好；（2）诊断性刮宫前无激素替代治疗，未经放疗或化疗；（3）根据国际妇科病理协会（ISGP）1987年病理诊断分型标准［1］，将子宫内膜增殖症患者的子宫内膜组织HE切片分为单纯性增生、复杂性增生、不典型增生。收集同期在病理科存档的功能失调性子宫出血患者的子宫内膜组织标本蜡块23例（均为增生期内膜标本），设为对照组（第1组）。

　　1.2方法

　　采用免疫组化二步法，CD44Ｖ6、MMP-2、TIMP-2单克隆抗体及二抗试剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司，MMP-9、TIMP-1单克隆抗体购自上海长岛生物技术有限公司。实验步骤严格按照操作方法说明进行。

　　1.3结果判定

　　参照FromowotZ综合计分法［2］，进行双盲半定量分析。随机选择5个高倍视野，计数内膜细胞总数和阳性细胞数，得出阳性细胞百分率及计分。0分：无阳性细胞；1分：阳性细胞1%～25%；2分：阳性细胞26%～49%；3分：阳性细胞≥50%；根据多数细胞的着色强度计算强度得分，0分：无着色；1分：浅褐色；2分：棕褐色；3分：深棕褐色；阳性率和强度计分相乘后的积分（0～9）分为3组：积分0为不表达（-）；积分1～3为低表达（+）；积分4～9为高表达（）。

　　1.4统计学方法

　　本研究实验数据均采用SPSS10.0统计软件处理。计数资料采用χ2检验。相关性分析采用Spearman等级相关性分析。以α=0.05为检验水准，P＜0.05为差异有统计学意义。