精子冷冻存活的近期发现

　　（1）人们曾发现对人类精子冷冻保存而言，单独使用 7% 甘油优于甘油与蛋黄柠檬酸扩散剂的混合液。适用于少量精液冷冻的半自动电子系统已被使用。 　　（2）人类精子保存基质（human sperm preservation medium，HSPM）为一种化学成分明确含甘油的改良 Tyrode液，与含相同浓度甘油的蛋黄柠檬酸基质（egg yolk citrate medium，ECM）相比，冷冻保存精子能力相仿甚至更佳。据报道使用冷冻保存于 HSPM 中的精子进行人工授精，其妊娠率要比使用冷冻保存于 ECM 中的精子高。 　　（3）如不考虑冷冻速度，在 HSPM 中的人类精子的慢速解冻通常要比快速解冻获得更高的冷冻存活率。 -80℃ 到 -85℃ 机械冷冻器可与贮存于液氮中一样；在 90d内可使冷冻精子维持相同的活力（运动能力），故提示冷冻保存的精子可在干冰（固体二氧化碳）中运输。 　　（4）利用解冻后精子的活动能力及去透明带仓鼠卵子穿透试验，对冷冻保存人类精子的含 蛋 黄 柠 檬 酸 的 TES-TRIS 两 性 离 子 缓 冲 系 统（ TES-TRIS zwitterion buffer system withegg yolk citrate，TESTCY）进行评估。结果表明单独应用 TESTCY 作为冷冻保护剂比含甘油的 TESTCY 更好。从而提示甘油不是一种理想的冷冻保护剂，不应加入冷冻保护基质中。 　　（5）然而另据报道含甘油的 TESTCY 作为冷冻保护剂，又要优于单独的甘油和甘油、蛋黄和柠檬酸混合液，故在 TESTCY 基质中将甘油包含在内作为一种冷冻保护剂，对获得足够的冷冻存活性能是至关重要的。 　　（6）对来自 98例正常对象的 584份精液，研究其精子计数、浓度及冷冻前和解冻后活动能力的自身差异。所有对象每种参数的个体自身差异是相似的。精子计数、精液体积和精子总数在 1～ 5d范围内随禁欲时间的延长而增加，而冷冻前和解冻后精子的运动能力不受禁欲时间的影响。 　　（7）有关精子头部超微结构改变程度的研究表明作为一种冷冻保存剂，不含甘油的TESTCY 要明显优于含甘油的。 　　（8）通过比较含不同浓度甘油的磷酸缓冲液对蛋黄、柠檬酸混合质基的冷冻保护作用，应用暗视野照明摄影术和激光多普勒测速器测定的精子活动力的百分比和速度，结果发现甘油浓度为 12% 和 16% 时其冷冻保护作用最好。 　　（9）对于保存在复杂的冷冻保护基质中的精子，带电脑的电子控速冰箱（Linde CRC-1）的冷冻存活作用与液氮中精液存放器（Linde BF-5 biologicalfreezer）相似，Sherman气雾冷冻方法的有效性及简单性已被证实，而且已有人推荐该方法。 　　（10）根据精子对于去透明带仓鼠卵的穿透能力，采用复杂的蛋黄甘油冷冻保护剂或只用甘油，解冻后精子的活动力并无差异。以 22℃ 空气和 37℃ 水浴解冻精液优于用 4℃ 水浴解冻，体外受精试验表明供者精子的冷冻存活有明显的个体差异，而不同的冷冻保护剂并未导致明显的个体差异。 　　（11）若将改良 HSPM 中的精子放置于塑料吸管之中，贮存于带电脑的自动生物冰箱中冷冻，然后在室温中解冻，有关运动能力、仓鼠卵穿透试验及顶体完整性的研究数据提示：若温度控制在 -5℃ ，并维持 10min，结合受精成功率则可能形成优良的冷冻保存方法。 　　（12）高质量的聚丙烯塑料是一种具有最好生物相容性且抗压的材料，有利于人类精子的长期冷冻保存。聚乙烯为基础的塑料容器，则有一种明显的运动抑制效应，而玻璃更易破碎，且偶可被洗涤剂污染。 （实习编辑：黄秀杰）